Unterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector | YAC vs M13 Phage Vector

Schlüsselunterschied - YAC gegen M13 Phagenvektor

Die DNA-Klonierung ist ein wichtiger Prozess, der die Vermehrung wichtiger DNA-Fragmente von Organismen ermöglicht. Es erfordert das Verbinden von spezifischer DNA mit Vektor-DNA, um rekombinante DNA zu erzeugen, die sich in den Wirtsorganismus umwandelt. Ein Vektor ist ein DNA-Molekül, das sich als Träger für fremdes genetisches Material in eine andere Zelle oder einen anderen Organismus verhält. Es sollte in der Lage sein, innerhalb des Wirtsorganismus zu replizieren und mehrere Kopien von rekombinanter DNA herzustellen. Es gibt verschiedene Arten von Vektoren, die beim DNA-Klonen verwendet werden. Hefe-künstliches Chromosom (YAC) und M13-Phagenvektor sind zwei Typen unter ihnen. Der Hauptunterschied zwischen YAC- und M13-Phagenvektor ist, dass YAC ein künstliches Chromosom ist, das in Hefezellen repliziert ist, während M13-Phagenvektor eine einzelsträngige zirkuläre DNA des Bakteriophagen M13 ist, die sich in E repliziert Coli Zellen. INHALT

1. Übersicht und Tastendifferenz

2. Was ist YAC

3? Was ist M13 Phage Vector

4. Seite an Seite Vergleich - YAC vs M13 Phagen Vektor

5. Zusammenfassung

Was ist ein YAC-Vektor?

YAC ist ein künstlich aufgebautes Chromosom, das in der Lage ist, ein großes Segment fremder DNA zu tragen und in den Hefezellen zu replizieren. Es besitzt Zentromer-, Telomer- und autonom replizierende Sequenzen, die für die Replikation und Stabilität essentiell sind. YAC sollte auch einen selektiven Marker oder Marker und Restriktionsstellen tragen, um ihn zu einem wirksamen Klonierungsvektor zu machen. Große Sequenzen im Bereich von 1000 kb bis 2000 kb können in YAC eingefügt und in Hefe transferiert werden.

Abbildung 01: YAC Vektor

Was ist M13 Phage Vektor?

Bakteriophage M13 ist ein Virus, das in

E Coli

infiziert und repliziert. Das Genom des M13-Bakteriophagen ist klein, etwa 6,7 ​​kb. Es ist eine einzelsträngige, zirkuläre und positive Sense-DNA. Dieses Virus infiziert spezifisch E Coli Bakterien durch F pilus. Sobald es die ssDNA in das Bakterium eingebracht hat, synthetisiert es seinen komplementären Strang und wird dsDNA oder die replikative Form (RF) von M13. RF kann sich wie ein Plasmid im Wirtsorganismus verhalten. Die dsDNA repliziert innerhalb von E Coli und produziert ssDNA, die neue Phagen trägt. Diese neuen Phagen werden fortlaufend von den E Coli befreit, ohne die Wirtszelle zu töten. Die Infektion verlangsamt jedoch das Wachstum von E Coli. dsDNA kann aus Bakterienzellen extrahiert und als Vektoren bei der DNA-Klonierung verwendet werden.Sie sind als M13-Phagenvektoren bekannt. Sie können leicht manipuliert und ähnlich wie Plasmidvektoren verwendet werden. Die inhärente Infektionsgefahr dieser M13-Phagen dient als gute Eignung zur Verwendung als Vektor beim Genklonieren. Bei der Entwicklung von M13 in einen Vektor sollten mehrere Elemente in sein Genom eingebaut werden. Sie sind ein Gen für das lac-Repressor (lacI) -Protein, die Operator-proximale Region des lac Z

-Gens, einen lac-Promotor und eine multiple Klonierungsstelle (Polylinker). Wenn dsDNA des M13 als Vektoren verwendet wird, kann es als ein Plasmidvektor behandelt werden. Die Verwendung von ssDNA M13 hat jedoch Vorteile bei der DNA-Sequenzierung und der ortsgerichteten Mutagenese.

Da der M13-Phagenvektor eine multiple Klonierungsstelle in der Region lacZ aufweist, können rekombinierte Vektoren leicht durch das blau / weiße Kolonie-Screening auf Agarplatten identifiziert werden, die IPTG und X-Gal enthalten. Blaue Plaques, die auf den Platten produziert werden, enthalten keine rekombinierten Phagen. Daher können Phagen mit Einfügungen für den Klonierungszweck ausgewählt werden.

Abbildung 02: Bakteriophage M13 Was ist der Unterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector? - diff Artikel Mitte vor Tabelle ->

YAC vs M13 Phagenvektor

YAC ist ein genetisch verändertes Chromosom, das in der Lage ist, ein großes Segment fremder DNA zu tragen und in den Hefezellen zu replizieren.

Der M13-Phagenvektor ist ein viraler Vektor, der von dem Bakteriophagen M13 entwickelt wurde, der verwendet wird, um fremde DNA in

E Coli einzufügen.
Zweck	YACs wurden entworfen, um große Fragmente genomischer DNA in Hefe zu klonieren. M13-Phagenvektoren werden verwendet, um fremde DNA in
E Coli einzufügen.
Länge einfügen	YACs können genomische Inserts mit Megabasengröße enthalten (1000 kb - 2000 kb). Die Größe der Einfügungen beträgt etwa 1 500 bps.
Konstruktion
YAC-DNA ist schwer intakt zu reinigen und erfordert eine hohe Konzentration zur Erzeugung des YAC-Vektorsystems.	Es tritt über zyklische photosynthetische Elektronenkette auf.
Stabilität
YAC ist instabil.	M13-Phagen können leicht extrahiert werden.
Größe
Enzyme sind größere Moleküle.	M13-Phagen sind stabiler als YAC.
Zusammenfassung - YAC vs M13 Phagenvektor
YAC ist ein künstlich konstruiertes Vektorsystem, das eine spezifische Region des Hefechromosoms verwendet, um große Segmente von genetischem Material in Hefezellen einzufügen. Der M13-Phagenvektor ist ein Vektorsystem, das von dem Bakteriophagen M 13 abgeleitet ist, der	E coli

als Wirtsorganismus verwendet. Dies ist der Hauptunterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector. Beide sind in rekombinanter DNA-Technologie und Gen-Klonierung gleichermaßen nützlich.

Referenz: 1. "Vektor. "Genetik-Notizen - Vektor. N. p., n. d. Web. 16. Mai 2017. // genetics-notes. wikispaces. com / Vector 2. "Künstliches Hefechromosom. "Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21. April 2017. Web. 16. Mai 2017..

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "M13B" Von J3D3 - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia